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同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立
引用本文:刘大飞,姜一曈,戚亭,程景,刘立奎,林文君,柴洪亮,杨天阔,王翀,华育平,曲连东,张洪英.同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立[J].中国预防兽医学报,2012,34(11).
作者姓名:刘大飞  姜一曈  戚亭  程景  刘立奎  林文君  柴洪亮  杨天阔  王翀  华育平  曲连东  张洪英
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨 150001;东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨 150040
2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100081
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨,150001
4. 黑龙江省农产品质量检验检测中心,黑龙江哈尔滨,150090
5. 东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨,150040
摘    要:为建立检测多种犬病的多重PCR方法,本研究根据GenBank登录犬瘟热病毒(CDV)的N基因序列、犬细小病毒(CPV)的NS基因序列和犬腺病毒(CAV)的E3基因序列,设计合成3对特异性引物.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV (507 bp)、CPV (287 bp)、CAV-Ⅰ (590 bp)和CAV-Ⅱ(1 027 bp)的多重PCR方法.实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测以上4种病毒,而狂犬病病毒检测为阴性;CDV、CPV、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的最低检出限分别为101.9 TCID50、101.7 TCID50、101.7 TCID50和102.2 TCID50.利用该方法对由黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为23.33%(7/30)、CPV阳性率为20%(6/30)、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的阳性率均为3.33%(1/30),证明建立的PCR方法可以用于临床诊断.

关 键 词:犬瘟热病毒  犬细小病毒  犬腺病毒
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