同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立 |
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引用本文: | 刘大飞,姜一曈,戚亭,程景,刘立奎,林文君,柴洪亮,杨天阔,王翀,华育平,曲连东,张洪英.同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立[J].中国预防兽医学报,2012,34(11). |
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作者姓名: | 刘大飞 姜一曈 戚亭 程景 刘立奎 林文君 柴洪亮 杨天阔 王翀 华育平 曲连东 张洪英 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨 150001;东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨 150040 2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100081 3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨,150001 4. 黑龙江省农产品质量检验检测中心,黑龙江哈尔滨,150090 5. 东北林业大学野生动物资源学院,黑龙江哈尔滨,150040 |
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摘 要: | 为建立检测多种犬病的多重PCR方法,本研究根据GenBank登录犬瘟热病毒(CDV)的N基因序列、犬细小病毒(CPV)的NS基因序列和犬腺病毒(CAV)的E3基因序列,设计合成3对特异性引物.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV (507 bp)、CPV (287 bp)、CAV-Ⅰ (590 bp)和CAV-Ⅱ(1 027 bp)的多重PCR方法.实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测以上4种病毒,而狂犬病病毒检测为阴性;CDV、CPV、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的最低检出限分别为101.9 TCID50、101.7 TCID50、101.7 TCID50和102.2 TCID50.利用该方法对由黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为23.33%(7/30)、CPV阳性率为20%(6/30)、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的阳性率均为3.33%(1/30),证明建立的PCR方法可以用于临床诊断.
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关 键 词: | 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬腺病毒 |
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