| 苦豆子cDNA文库的构建 |
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| 作者姓名： | 罗淑萍 张智俊 许键 喻梅辉 |
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| 作者单位： | 1. 新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052
2. 南京大学,生命科学学院,南京,213092 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39660022),国家863计划资助项目(Z17-01-01-6) |
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| 摘 要： | 以产于新疆豆科碟形花亚科槐属植物苦豆子(Sophoraalopecuroides.L)幼苗为材料,用改进的一步抽提法提取了总RNA,再以生物素标记的Oligo(dT)为引物,经过磁性球珠法,分离出mRNA,反转录酶催化合成cD NA。与EcoRIAdaptor连接,再经SeptacrylS 400分级,磷酸化后将双链cDNA克隆于λgt11载体中,经体外包装和感染Y1090菌株,成功构建了效价为0.9×106pfu·ml-1苦豆子幼苗cDNA文库。随机挑选5个重组噬斑,PCR法检查出重组克隆的插入片段平均大于1000bp,说明cDNA文库质量较高。
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| 关 键 词： | 苦豆子 cDNA文库 PCR |
| 文章编号： | 1007-8614(2004)02-0008-04 |
| 修稿时间： | 2004-02-28 |
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