| 纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 刘海艳,白龙,赵海波,杨明明,曹斌云.纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达[J].中国农业大学学报,2012,17(5):92-98. |
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| 作者姓名： | 刘海艳 白龙 赵海波 杨明明 曹斌云 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目，陕西省科技统筹创新工程计划 |
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| 摘 要： | 为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠(CMC)改良的BHM培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,采用革兰氏染色法和16SrDNA基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定;设计引物对P扩增其纤维素酶基因,连于pET-28a(+)载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,表达结果采用SDS-PAGE和测定表达产物活性的方法来检验。结果显示,本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维素酶活的短小芽孢杆菌BY-1,该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,最适宜温度和pH分别为55℃和7.45,在此条件下最高酶活性为0.921 6μmol/(mL.min);此外,还成功克隆出1个1 851bp的纤维素酶新基因bglC-BY,具有GH9/CBM3纤维素酶结构,经IPTG诱导,SDS-PAGE图谱上于70ku有1个明显的蛋白条带,表达产物酶活性为0.541 3μmol/(mL.min)。本研究筛选出的短小芽孢杆菌内切纤维素酶活较高,具有一定的应用前景。
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| 关 键 词： | 纤维分解菌 筛选 纤维素酶基因 克隆 表达 |
| 收稿时间： | 2011/12/19 0:00:00 |
Cloning and expression of a novel cellulase gene from an solated Bacillus pumilus strain |
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| LIU Hai-yan,BAI Long,ZHAO Hai-bo,YANG Ming-ming and CAO Bin-yun.Cloning and expression of a novel cellulase gene from an solated Bacillus pumilus strain[J].Journal of China Agricultural University,2012,17(5):92-98. |
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| Authors: | LIU Hai-yan BAI Long ZHAO Hai-bo YANG Ming-ming and CAO Bin-yun |
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| Institution: | *(College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cellulolytic microbes screening cellulase gene cloning expression |
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