| 一株纤维降解菌β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达及酶学性质分析 |
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| 作者姓名： | 王后福 廖奇 李鹏飞 陶杨 鲁琼芬 杨仁辉 冷静 |
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| 作者单位： | 云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;领军人才项目;云南省现代农业(肉羊)产业技术体系项目;云南省科技计划 |
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| 摘 要： | 试验对1株娄彻氏链霉菌(B5)的β-葡萄糖苷酶(高活性纤维降解酶)基因进行克隆,通过构建高效表达的载体实现基因表达,对所得表达产物的酶学性质进行测定分析,为饲用纤维素酶的开发利用提供参考。通过PCR扩增B5的Egl基因的完整CDS序列,构建pET-32a-egl表达载体,转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞。试验成功构建了高产β-葡萄糖苷酶的基因工程大肠杆菌,实现了β-葡萄糖苷酶的分泌表达,其分子量约4.1×10-4 U,酶学特性分析表明,在40℃、pH值8、底物浓度为3.0×10~(-2) mol/L时,酶活力最高,为1 085 U/mL。
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| 关 键 词： | 娄彻氏链霉菌 β-葡萄糖苷酶 基因克隆 酶学性质 纤维降解 |
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