| 绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆 |
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| 引用本文： | 任卫青,陈亮,和小娥,何俊丹,王新庄.绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆[J].兽医大学学报,2012(5):788-792. |
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| 作者姓名： | 任卫青 陈亮 和小娥 何俊丹 王新庄 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450001 |
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| 基金项目： | 河南省基础与前沿研究计划资助项目（092300410081） |
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| 摘 要： | 从胚胎发育阶段、饲养层和培养体系等方面对影响绵羊类ES细胞分离、克隆效率的因素进行探讨。结果显示：致密桑葚胚和囊胚的ICM增殖率高于囊胚和孵化囊胚。绵羊类ES细胞在同源绵羊胎儿成纤维细胞（SEF）上生长比较缓慢,最终传代次数也低于小鼠胎儿成纤维细胞（MEF）组。培养液中同时添加胎牛血清（FBS）和Knock-out血清替代品（KSR）,绵羊类ES传至7代,添加了碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）后,最高可传至8代,而单纯添加KSR或FBS,分别传至4代和5代。对类ES细胞进行AKP染色、核型分析、体外分化试验,证实分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且表达多潜能性细胞因子Nanog。由此认为,致密桑葚胚和囊胚更适合绵羊类ES细胞的体外分离和培养,而且MEF更适合于绵羊类ES细胞的分离传代,培养液中添加5%FBS和15%KSR,比较适合类ES细胞的分离传代,bFGF对绵羊类ES细胞的增殖具有促进作用。
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| 关 键 词： | 绵羊 胚胎干细胞 分离与培养 饲养层 克隆 |
The isolation and cloning of sheep embryonic stem-like cells |
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| Authors: | REN Wei-qing CHEN Liang HE Xiao-e HE Jun-dan WANG Xin-zhuang |
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| Institution: | (College of Animal Husbandry and Veterinary Engineering,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sheep embryonic stem cells isolation and culture feeder layers clone |
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