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模式贝类Helix aspersa Mueller触角cDNA文库的构建
引用本文:郑伟,李继刚,吴岷.模式贝类Helix aspersa Mueller触角cDNA文库的构建[J].植物保护,2009,35(5):35-38.
作者姓名:郑伟  李继刚  吴岷
作者单位:河北大学,保定,071002
基金项目:国家科技部科技基础性工作专项项目,国家自然科学基金 
摘    要:利用Trizol试剂,从实验室培养的模式贝类散大蜗牛(Helix aspersa)成体触角中提取总RNA;应用SMART技术,反转录合成cDNA第1链,长距离PCR扩增得到双链cDNA,分级分离后将片段插入λTripIEx2,再经包装完成蜗牛触角的cDNA文库构建。经平板培养及蓝白斑法检测,未扩增文库滴度达到1.22×106 pfu/mL,扩增文库滴度达到5.6×109 pfu/mL,重组率达到96.4%以上。挑取部分克隆转成质粒,酶切分析显示插入片段平均长度大约为500 bp。经过上述工作,得到了一个高质量散大蜗牛触角cDNA文库,为进一步研究陆生贝类化学感受相关基因及其与行为的相互关系奠定了基础。

关 键 词:陆生贝类Helix  aspersa  触角  SMART技术  cDNA文库

Construction of cDNA library of the tentacle of Helix aspersa
Zheng Wei,Li Jigang,Wu Min.Construction of cDNA library of the tentacle of Helix aspersa[J].Plant Protection,2009,35(5):35-38.
Authors:Zheng Wei  Li Jigang  Wu Min
Institution:Hebei University, Baoding071002, China
Abstract:The cDNA library of the tentacle of the snail Helix aspersa Mueller was constructed. The tittering of the unamplified library and the amplified library were 1.22×106 pfu/mL and 5.6×109 pfu/mL, respectively. The positive screening tests showed that the recombinant ratio was over 96.4%, and the average size of inserted fragments reached about 500 bp.
Keywords:landsnail Helix aspersa  tentacle  SMART  cDNA library
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