藜麦内生细菌LS3发酵条件优化及其抑菌机制初探

藜麦黑茎病是危害藜麦的主要病害之一，可引起藜麦倒伏、籽粒空瘪和不育，严重影响藜麦籽粒的产量和品质。前期从藜麦穗中分离获得1株对藜麦黑茎病菌（Ascochyta caulina）具有良好抑菌活性的内生细菌，命名为LS3，为进一步开发应用该菌株，采用单因素试验法对LS3菌株的最佳培养基、碳源、氮源、温度进行筛选，对其发酵条件进行优化，采用鉴定培养基法对LS3菌株的抑菌活性物质进行检测，对其抑菌机制进行初探。结果表明，LS3菌株发酵所需最佳培养基为YSP培养基，最佳碳源为蔗糖，最佳氮源为牛肉膏+酵母粉，发酵最佳温度为28℃。对转速、装液量、接种量、pH以及发酵时间5个因素进行正交发酵优化，结合方差分析，并考虑成本因素，最终确定LS3菌株最佳发酵条件为：转速130 r/min，装液量150 mL/300 mL，接种量1%,pH值7.0，发酵时间96 h。对LS3菌株细胞壁降解酶活性检测发现，LS3菌株可分泌β-1,4-葡聚糖酶和胞外蛋白酶，但不能产生几丁质酶和β-l,3-葡聚糖酶。