| 抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定 |
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| 引用本文： | 王斌,刘培欣,李涛,王高玲,修金生,胡崇伟,刘恒贵.抗新城疫病毒HN蛋白单链抗体的原核表达及其功能鉴定[J].中国预防兽医学报,2014(5):383-386. |
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| 作者姓名： | 王斌 刘培欣 李涛 王高玲 修金生 胡崇伟 刘恒贵 |
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| 作者单位： | 福建农林大学动物科技学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0302013006) |
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| 摘 要： | 为制备抗鸡新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)单链抗体(scFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗NDV HN单克隆抗体杂交瘤细胞株总RNA,通过RT-PCR扩增抗HN蛋白抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其插入含有Linker序列的载体pET-scIG中,构建抗HN的scFv(HN-scFv)原核表达重组质粒pET-HN-scFv并在大肠杆菌中诱导表达。结果显示HN-scFv主要以包涵体形式存在。将包涵体进行复性和Ni-NTA层析柱纯化后用于流式细胞仪检测,结果显示复性纯化后的HN-scFv能够识别表达于293T细胞表面的NDV HN蛋白。该scFv的制备为进一步对该抗体进行改造奠定了基础。
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| 关 键 词： | 单链抗体 新城疫病毒 血凝素-神经氨酸酶 |
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