| 猪繁殖和呼吸综合症病毒河南地方株ORF5／6基因的克隆及真核表达 |
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| 引用本文： | 党占国,李志勇,夏平安,陈溥言,崔保安,李伟娟,王中明.猪繁殖和呼吸综合症病毒河南地方株ORF5／6基因的克隆及真核表达[J].畜牧兽医科技信息,2008(8). |
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| 作者姓名： | 党占国 李志勇 夏平安 陈溥言 崔保安 李伟娟 王中明 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
2. 焦作市动物疫病预防控制中心,焦作,454003
3. 南京农业大学动物医学院,南京,210095 |
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| 基金项目： | 中国博士后基金项目资助 |
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| 摘 要： | 应用RT-PCR方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)河南地方株的ORF5和0RF6基因。将扩增基因克隆入真核表达载体pcDNA3.0中,设计不同引物自行构建重组质粒PcDNA-ORF5、ORF6和pcDNA-ORF5/6。运用磷酸钙法将重组质粒分别瞬时转染293T细胞,经流式细胞和westbloting试验分析表明共表达重组质粒PcD-NA-ORF5/6表达蛋白能够与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,而pcDNA-ORF5-ORF6在293T细胞很难检测到蛋白表达。该结果表明蛋白质生物活性和其蛋白质空间构象有一定关系,也为下一步进行构建PRRSV假型病毒来研究ORF5/6蛋白的结构与功能的关系奠定了基础。
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| 关 键 词： | PRRSV ORF5/6基因 克隆 真核表达 |
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