免疫组化检测鸭疫里默氏杆菌(RA)方法的建立 |
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作者姓名: | 孟琼华 程安春 |
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作者单位: | [1]成都中医药大学方剂系,四川成都610081 [2]四川农业大学禽病中心,四川成都610081 |
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摘 要: | 本文建立了间接免疫组化法(HRP-间接法)检测组织中的鸭疫里默氏杆菌,并从固定液、抗原修饰方法、洗涤液和洗涤方法、复染液、粘片剂几个方面进行了优化,其结果为以PLP为固定液,以ALES为粘片剂,以0.3%的甲醇-H2O2在湿盒中室温下孵育20min消除组织中的过氧化物酶及假过氧化物酶活性,免抗RAlgG与羊抗兔-HRP的稀释比例均为1:25,以4℃过夜作兔抗RAlgG的孵育条件,以10%白蛋白0.05%Tween-20pH7.4的PBS湿盒内室温孵育60min处理组织中非特异性染色因素;以TBST为洗涤液,空气振荡器70转/min摇洗2次,每次10min洗涤切片;以0.5%甲苯胺蓝作为复染液。此方法具有特异性强,无假阳性.经济,无需特殊仪器,简单易行的优点。
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关 键 词: | 免疫组化 鸭疫里默氏杆菌 检测 |
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