| 猪流行性腹泻病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 高志强,汪 琳,姜 焱,蒲 静,赵相鹏,尹 羿,张 伟.猪流行性腹泻病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立[J].中国动物检疫,2019,36(1):58-64. |
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| 作者姓名： | 高志强 汪 琳 姜 焱 蒲 静 赵相鹏 尹 羿 张 伟 |
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| 作者单位： | 北京出入境检验检疫局技术中心;江苏出入境检验检疫局技术中心 |
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| 基金项目： | 北京市科技计划项目（Z171100001317011）；国家重点研发计划项目（2016YFD0501104） |
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| 摘 要： | 为建立一种适用于现场快速检测的猪流行性腹泻病毒(PEDV)LAMP技术,基于羟基萘酚蓝(HNB)的可视化显色特点,根据PEDV M基因编码区序列,设计合成1套引物,通过反应物浓度和反应条件优化,建立了可闭管检测的PEDV RT-LAMP检测方法。特异性和灵敏度试验结果显示,建立的RT-LAMP检测技术快速、灵敏、特异,可于1 h内检出0.2 mL 0.1 TCID50/mL的病毒RNA,与实时荧光RT-PCR检测方法灵敏度一致,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型以及猪链球菌2型核酸不发生交叉反应。利用该方法对187份送检的粪拭子及病死猪组织样品进行应用检测,检出阳性样品9份,与荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。试验结果表明,所建立的方法快速、特异,重复性满足要求,适用于送检样品的PEDV快速检测。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 HNB显色 RT-LAMP |
Development of HNB-based Visual RT-LAMP Method for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus |
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| Gao Zhiqiang,Wang Lin,Jiang Yan,Pu Jing,Zhao Xiangpeng,Yin Yi,Zhang Wei.Development of HNB-based Visual RT-LAMP Method for Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(1):58-64. |
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| Authors: | Gao Zhiqiang Wang Lin Jiang Yan Pu Jing Zhao Xiangpeng Yin Yi Zhang Wei |
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| Institution: | (Beijing Inspection and Quarantine Testing Center,Beijing 100026,China;Beijing Inspection and Quarantine Testing Center,Nanjing,Jiangsu 210001,China) |
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| Abstract: | Gao Zhiqiang;Wang Lin;Jiang Yan;Pu Jing;Zhao Xiangpeng;Yin Yi;Zhang Wei(Beijing Inspection and Quarantine Testing Center,Beijing 100026,China;Beijing Inspection and Quarantine Testing Center,Nanjing,Jiangsu 210001,China) |
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| Keywords: | porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) HNB-based color reaction RT-LAMP |
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