| 蓝舌病病毒血清Ⅰ型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定 |
| |
| 引用本文： | 李占鸿,杨恒,宋子昂,高林,李华春,廖德芳.蓝舌病病毒血清Ⅰ型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定[J].中国动物检疫,2019(5):77-84. |
| |
| 作者姓名： | 李占鸿 杨恒 宋子昂 高林 李华春 廖德芳 |
| |
| 作者单位： | 云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31760744);国家公益性行业(农业)科研专项(201303035);云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(2017HB055) |
| |
| 摘 要： | 为表达具有天然构象的蓝舌病病毒血清1型(BTV1)主要结构蛋白VP2、VP3、VP5和VP7,研制针对流行于我国的BTV1型毒株的病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)疫苗提供基础,将编码BTV1 VP2和VP5蛋白的基因分别克隆到双表达载体pFastBacDual的启动子pPH和pP10下游,构建重组质粒pFastBacDualBTV1-VP2-VP5,将重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒rBacmidBTV1-VP2-VP5,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacBTV1-VP2-VP5;按照同样策略,制备重组杆状病毒rBacBTV1-VP3-VP7。使用兔抗BTV1-VP5蛋白多克隆抗体和鼠抗BTV-VP7蛋白单克隆抗体,分别对rBacBTV1-VP2-VP5和rBacBTV1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行间接免疫荧光试验(IFA)检测,结果病毒感染细胞可见特异性荧光出现;使用兔抗BTV1-VP2蛋白多克隆抗体和兔抗BTV1-VP3蛋白多克隆抗体,分别对rBacBTV1-VP2-VP5和r BacBTV1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行Western-blot检测,可见相对分子质量约100 kDa左右的条带,大小与预期相符。IFA检测和Western Blot检测结果显示,BTV1 VP2、VP3、VP5和VP7蛋白均得以表达,且具有良好的反应原性。
|
| 关 键 词： | 蓝舌病病毒血清1型 主要结构蛋白 杆状病毒表达 |
Expression and Identification of VP2 and VP5,VP3 and VP7 Proteins of Bluetongue Virus Serotype 1 in Baculovirus System |
| |
| Li Zhanhong,Yang Heng,Song Ziang,Gao Lin,Li Huachun,Liao Defang.Expression and Identification of VP2 and VP5,VP3 and VP7 Proteins of Bluetongue Virus Serotype 1 in Baculovirus System[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019(5):77-84. |
| |
| Authors: | Li Zhanhong Yang Heng Song Ziang Gao Lin Li Huachun Liao Defang |
| |
| Institution: | (Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory,Yunnan Animal Science and VeterinaryInstitute,Kunming,Yunnan 650224,China) |
| |
| Abstract: | Li Zhanhong;Yang Heng;Song Ziang;Gao Lin;Li Huachun;Liao Defang(Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory,Yunnan Animal Science and VeterinaryInstitute,Kunming,Yunnan 650224,China) |
| |
| Keywords: | bluetongue virus serotype 1 major structural proteins baculovirus expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
