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NF-κB和Nrf2信号通路在成肌细胞抗氧化应激中的作用
作者姓名:李君  王鹤洁  安洁  李俊玲  窦敏敏  翟竹汇  何浪  李振月  秦健  杜荣
作者单位:1.山西农业大学 动物医学学院,山西 太谷 030801;2.山西农业大学 生命科学学院,山西 太谷 030801;3.山西农业大学 动物医学学院,山西 太谷 030801;山西农业大学 生命科学学院,山西 太谷 030801;山西农业大学 实验教学中心,山西 太谷 030801
基金项目:国家自然科学基金 ( 32272964 );国家自然科学基金 ( 31872438 );山西省基础研究计划项目 ( 20210302123394 );山西省回国留学人员科研资助项目 ( 2022-102 );山西省留学回国人员科技活动择优资助项目;山西农业大学横向科技项目 ( 2015HX12 );山西农业大学中青年拔尖创新人才支持计划 ( BJRC201204 )
摘    要:成肌分化是动物肌肉发育的关键环节,与其健康和生产性能密切相关.为研究成肌细胞抗氧化应激的机制,试验分离了绵羊胎儿成肌细胞,利用地塞米松处理分化中的成肌细胞建立氧化应激模型;试验分为4组,包括正常分化48 h组(N 48 h)、地塞米松处理分化48 h组(Dex 48 h)、正常分化72 h组(N 72 h)、地塞米松处理分化72 h组(Dex 72 h),通过倒置显微镜观察各组细胞的形态变化,利用ROS检测试剂盒检测ROS含量,用RNA-seq检测NF-κB和Nrf2 信号通路相关基因mRNA的表达情况,并采用皮尔森相关系数法分析相关性,用STRING数据库分析蛋白的互作关系.结果表明,地塞米松诱导的氧化应激对成肌分化具有明显的抑制作用,且抑制作用随处理时间的延长而增加;ROS含量较各自对照组均显著增加,且随着处理时间的延长而增加.由RNA-seq分析结果可知,与对照组相比,地塞米松处理组NF-κB和Nrf2信号通路被激活,上游基因P65、IKK2、IκBα、IκBβ、Nrf2、Keap1以及相应下游靶基因SOD1、SOD2、FHC、HO-1、GSH-Px的mRNA相对表达量均显著升高,各基因之间存在不同程度的相关性以及错综复杂的蛋白互作关系,其中Keap1基因是联系2条通路的重要枢纽.综上所述,在成肌细胞分化过程中,NF-κB和Nrf2信号通路交互联系,共同在地塞米松诱导的成肌细胞氧化应激中发挥抗氧化作用.

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