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利用转基因RNA干涉提高家蚕对BmNPV的抗性初探
引用本文:黄科,李春峰,甘进锋,蒙炳超,李智,周泽扬. 利用转基因RNA干涉提高家蚕对BmNPV的抗性初探[J]. 蚕业科学, 2009, 35(2)
作者姓名:黄科  李春峰  甘进锋  蒙炳超  李智  周泽扬
作者单位:西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑学重点开放实验室,重庆,400716;西南大学蚕学与系统生物学研究所,农业部蚕桑学重点开放实验室,重庆,400716;重庆师范大学,重庆,400047
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家重点基础研究发展规划(973计划) 
摘    要:基于探讨利用转基因RNA干涉技术使家蚕获得对核型多角体病毒抗性的目的,将家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的DNA聚合酶基因、蛋白激酶(PK1)基因以及bro-d和orf1629基因的部分编码片段,分别以其反向重复的形式与家蚕Actin3启动子连接,构建了基于piggyBac转座子载体的转基因表达载体,通过显微注射于家蚕卵,获得了36~107个G1蛾区,得到了20~23头转基因阳性家蚕。经Southern杂交及RT-PCR分析表明,BmNPV的4个反向重复片段都已经导入家蚕基因组中,并且可以进行转录。攻毒实验结果表明,BmNPV的DNA聚合酶基因和PK1基因反向重复片段对病毒的增殖有抑制作用,从而使家蚕对BmNPV具有一定抗性;而BmNPV的bro-d和orf1629基因反向重复片段对病毒的增殖没有抑制作用。针对特定病毒的转基因RNAi技术有望使家蚕获得对该病毒的抗性。

关 键 词:家蚕  piggyBac转座子  RNA干涉  转基因  家蚕核型多角体病毒

A Preliminary Study on Utilizing RNA Interference to Confer Enhanced Resistance to BmNPV in Transgenic Silkworm
HUANG Ke,LI Chun-Feng,GAN Jin-Feng,MENG Bing-Chao,LI Zhi,ZHOU Ze-Yang. A Preliminary Study on Utilizing RNA Interference to Confer Enhanced Resistance to BmNPV in Transgenic Silkworm[J]. Acta Sericologica Sinica, 2009, 35(2)
Authors:HUANG Ke  LI Chun-Feng  GAN Jin-Feng  MENG Bing-Chao  LI Zhi  ZHOU Ze-Yang
Affiliation:HUANG Ke1 LI Chun-Feng1 GAN Jin-Feng1 MENG Bing-Chao1 LI Zhi1 ZHOU Ze-Yang1,2(1Institute of Sericulture , Systems Biology,Key Sericulture Laboratory of Ministry of Agriculture,Southwest University,Chongqing 400716,China,2Chongqing Normal University,Chongqing,400047,China)
Abstract:In order to explore whether transgenic technology and RNA interference can be used to enhance silkworm's resistance to Bombyx mori nucleopolyhedrovirus(BmNPV),the partial sequences of four BmNPV genes,namely DNA polymerase,protein kinase(PK1),bro-d and orf1629,were selected and used to prepare their inverted repeat sequences.The inverted repeat sequences were then ligated to the promoter of BmActin 3 on piggyBac transposon to generate transgenic vectors.Eggs were microinjected with the transgenic vectors an...
Keywords:Bombyx mori  piggyBac transposon  RNAi  Transgene  Bombyx mori nucleopolyhedrovirus  
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