| 甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价 |
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| 引用本文： | 秦智锋,张彩虹,孙洁,刘建利,卢体康,阮周曦,林庆燕,吕建强,曹琛福,曾少灵,陈书琨,廖立珊,花群义.甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价[J].中国预防兽医学报,2013(1):48-53. |
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| 作者姓名： | 秦智锋 张彩虹 孙洁 刘建利 卢体康 阮周曦 林庆燕 吕建强 曹琛福 曾少灵 陈书琨 廖立珊 花群义 |
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| 作者单位： | 深圳出入境检验检疫局;深圳市检验检疫科学研究院;深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室 |
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| 基金项目： | 深圳市地方性标准制订项目(2010年安全类46);深圳出入境检验检疫局青年科技计划(SZ2011201) |
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| 摘 要： | 自甲型H1N1(2009)流感病毒于2009年在世界多个国家暴发流行后,许多国家的猪群中检测到该病毒的存在,因此建立快速准确的甲型H1N1流感病毒的检测方法成为迫切需求。本研究针对甲型H1N1(2009)流感病毒NA基因设计特异性引物和探针,建立甲型H1N1(2009)流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法。并将该方法与WHO推荐美国CDC建立的检测方法和美国农业部推荐的检测方法进行比较。通过田间试验验证该方法在实际应用中的效果。结果表明:本研究建立的方法对检测甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的灵敏度达到10-6,与WHO推荐的A型流感病毒实时荧光PCR检测方法的灵敏度一致,并且高于美国农业部推荐方法的检测灵敏度(10-5);该方法特异性强,与经典型H1N1和其他亚型流感病毒株无任何交叉反应。与香港兽医化验所进行了检测比对,检测灵敏度和特异性完全一致。近3 800份的田间试验表明,所建立的方法准确可靠。本研究所建立检测方法快速灵敏,检测结果准确可靠,适合用于甲型H1N1(2009)流感病毒的分子生物学检测和监测。
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| 关 键 词： | 甲型H1N1(2009)流感病毒 实时荧光RT-PCR 快速检测 |
Development and evaluation of real time RT-PCR for pandemic H1N1(2009) influenza virus |
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| QIN Zhi-feng,ZHANG Cai-hong,SUN Jie,LIU Jian-li,LU Ti-kang,RUAN Zhou-xi,LIN Qing-yan,LV Jian-qiang,CAO Chen-fu,ZENG Shao-ling,CHEN Shu-kun,LIAO Li-shan,HUA Qun-yi.Development and evaluation of real time RT-PCR for pandemic H1N1(2009) influenza virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013(1):48-53. |
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| Authors: | QIN Zhi-feng ZHANG Cai-hong SUN Jie LIU Jian-li LU Ti-kang RUAN Zhou-xi LIN Qing-yan LV Jian-qiang CAO Chen-fu ZENG Shao-ling CHEN Shu-kun LIAO Li-shan HUA Qun-yi |
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| Institution: | 1(1.Shenzhen Entry-Exit Inspection & Quarantine Bureau,Shenzhen 518001,China;2.Shenzhen City Academy of Inspection and Quarantine,Shenzhen 518001,China;3.Shenzhen Key Laboratory of Inspection Research & Development of Alien Pests,Shenzhen 518045,China) |
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