| 大白菜cDNA-AFLP分析体系的优化 |
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| 引用本文： | 郭莹,杨晓云,张清霞,司朝光,张淑霞,王媛. 大白菜cDNA-AFLP分析体系的优化[J]. 分子植物育种, 2010, 8(5). DOI: 10.3969/mpb.008.001003 |
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| 作者姓名： | 郭莹 杨晓云 张清霞 司朝光 张淑霞 王媛 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学园林园艺学院,青岛,266109;青岛市农业科学研究院,青岛,266100 |
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| 基金项目： | 国家十一五科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 本研究以高感、高抗大白菜小黑点病的大白菜叶柄为试材,对影响cDNA-AFLP分析体系的几个关键因素进行分析,建立了适宜大白菜的cDNA-AFLP分析体系,并得到了较为清晰可辨的cDNA-AFLP图谱。结果表明:试剂盒法提取的NA较完整,纯度较高;400ng的cDNA利用FastDigest EcoRⅠ和Fast-Digest MseⅠ进行快速双酶切50min,酶切充分;在20μL的体系中,连接产物取原液作为预扩增反应的模板,并且预扩增反应的循环数为35,预扩增产物稀释20倍作为选择性扩增的模板,扩增结果最佳;MBI2×PC Master Mixture反应体系满足扩增反应的需要,不需要另外摸索反应条件,节省了试验成本;选用64对AFLP引物进行扩增,筛选出具有多态性条带丰富的AFLP引物45对。本研究为利用cDNA-AFLP分析大白菜小黑点病的的发病机理奠定了基础。
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| 关 键 词： | 大白菜 cDNA-AFLP 分析体系 小黑点病 |
Optimization of cDNA-AFLP Analysis System for Chinese Cabbage |
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| Guo Ying,Yang Xiaoyun,Zhang Qingxia,Si Chaoguang,Zhang Shuxia,Wang Yuan. Optimization of cDNA-AFLP Analysis System for Chinese Cabbage[J]. Molecular Plant Breeding, 2010, 8(5). DOI: 10.3969/mpb.008.001003 |
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| Authors: | Guo Ying Yang Xiaoyun Zhang Qingxia Si Chaoguang Zhang Shuxia Wang Yuan |
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| Affiliation: | Guo Ying 1 Yang Xiaoyun2 Zhang Qingxia2 Si Chaoguang 2 Zhang Shuxia2 Wang Yuan2 1 College of Horticulture and Landscape,Qingdao Agricultural University,Qingdao,266109,2 Qingdao Academy of Agricultural Sciences,266100 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cDNA-AFLP |
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