埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基融合蛋白的真核表达与纯化 |
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引用本文: | 王中一,李佳明,付莹莹,郭振东,陆兵,钱军,刘林娜.埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基融合蛋白的真核表达与纯化[J].吉林农业大学学报,2019,41(1):92-96. |
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作者姓名: | 王中一 李佳明 付莹莹 郭振东 陆兵 钱军 刘林娜 |
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作者单位: | 军事科学院军事医学研究院,北京,100850;吉林农业大学动物科学技术学院,长春,130118 |
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基金项目: | 国家重点研发计划;国家自然科学基金 |
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摘 要: | 埃博拉病毒糖蛋白与病毒黏附、入侵宿主细胞等过程密切相关,为了更好地研究该糖蛋白与宿主细胞的相互作用,拟通过哺乳动物细胞表达系统,构建GP1亚基Fc标签融合蛋白。经鉴定,成功构建了埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基的真核表达载体pFUSE-GP1-hIgG1-Fc2,并利用该载体及293T细胞构建了表达GP1亚基融合蛋白的哺乳动物细胞系。该融合蛋白N端带有IL2分泌信号肽,C端带有人IgG1-Fc2标签,可在293T细胞以分泌表达的方式存在于细胞培养上清中,而后利用Protein A亲和层析进行融合蛋白纯化。经Western Blots鉴定,成功制备GP1-Fc融合蛋白。这不仅为埃博拉病毒糖蛋白的研究提供了技术支撑,也为其他种类蛋白的哺乳动物细胞真核表达纯化提供了新思路。
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关 键 词: | 埃博拉病毒病 糖蛋白 真核表达 Protein A亲和层析 |
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