| 鸡Mx基因的表达及其抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 谭复善,李文超,崔雷,刘丹,秦红刚,孟庆文.鸡Mx基因的表达及其抗血清的制备[J].中国预防兽医学报,2009,31(5). |
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| 作者姓名： | 谭复善 李文超 崔雷 刘丹 秦红刚 孟庆文 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家自然基会项目，国家科技支撑计划重点项目，国家重点实验室资助项目，中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目 |
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| 摘 要： | Mx蛋白已被证明具有抗A型流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的生物活性.本研究通过PCR扩增,将Mx基因克隆至pMD18-T载体;经测序验证后将Mx基因克隆到原核表达载体pProExHTa和pcDNA3.1中.以构建的重组质粒pProExHTa-Mx转化大肠杆菌BL21,进行诱导表达,以切胶纯化方式回收了Mx融合蛋白,加佐剂乳化,免疫新西兰白兔制备抗血清;SDS-PAGE和western blot分析表明:Mx基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式稳定表达,表达产物的相对分子量约80 ku,与预期值相符;抗血清能与Mx蛋白发生特异性反应.以真核表达重组质粒pcDNA3.1-Mx转染293T细胞,间接免疫荧光试验结果表明:原核表达蛋白免疫动物制备的抗血清与真核表达的Mx蛋白发生良好的免疫反应,表明用原核表达的Mx蛋白具有真核表达Mx蛋白相似的免疫学活性.抗血清的制备为鸡Mx蛋白的功能研究、Mx蛋白在转基因动物机体中表达的检测奠定了基础.
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| 关 键 词： | 鸡 Mx基因 原核表达 抗血清 |
Preparation of the rabbit antiserum against chicken Mx |
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| TAN Fu-shan,LI Wen-chao,CUI Lei,LIU Dan,QIN Hong-gang,MENG Qing-Wen.Preparation of the rabbit antiserum against chicken Mx[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(5). |
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| Authors: | TAN Fu-shan LI Wen-chao CUI Lei LIU Dan QIN Hong-gang MENG Qing-Wen |
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