| 转EGFP基因猪胎儿神经干细胞的体外分化 |
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| 引用本文： | 郑月茂,赵雪,贺小英,权富生,刘军,张涌. 转EGFP基因猪胎儿神经干细胞的体外分化[J]. 中国农业科学, 2009, 42(9): 3305-3313. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.09.037 |
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| 作者姓名： | 郑月茂 赵雪 贺小英 权富生 刘军 张涌 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学生物工程研究所,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，西北农林科技大学科研专项基金 |
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| 摘 要： | ![]()
【目的】获得转EGFP基因神经干细胞并监测其自我更新、增殖和多向分化潜能;通过用EGFP对神经干细胞进行标记和体外追踪实验,为EGFP作为示踪标记对神经干细胞进行体内移植研究奠定基础。【方法】利用神经干细胞培养技术体系,从胎龄30 d猪胎儿脑组织中分离培养神经干细胞,通过脂质体介导转染技术,将EGFP基因导入神经干细胞,诱导转基因神经干细胞贴壁分化,观察其体外增殖、分化特点。采用RT-PCR技术检测干细胞和分化细胞表面标志或相关基因。【结果】成功分离培养出神经干细胞,获得转EGFP基因神经干细胞,神经干细胞在表达EGFP的同时仍具有多向分化潜能。神经干细胞中Nestin表达强阳性,NogoA、DCX、CyclinD2、CD133、Hes1、Oct4、CD-90、Nanog和Sox2表达阳性;体外诱导的神经干细胞可以分化为星形胶质细胞(表达GFAP)、少突胶质细胞(表达GalC)和神经元细胞(表达NF、NSE和MAP2);能分化为脂肪细胞(表达LPL和PPARγ-D)、成骨细胞(表达Osteonectin和Osteocalcin)、肌细胞(表达myf-5、myf-6和myoD)、内皮细胞(表达CD31、CD34、CD144和eNOS)和软骨细胞(表达COL2A1)。【结论】从猪胎儿大脑组织分离神经干细胞具有可行性和有效性,转EGFP基因神经干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能,可以用EGFP对神经干细胞进行标记、追踪,作为示踪标记进行神经干细胞体内移植研究。
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| 关 键 词： | Verdana" >神经干细胞 EGFP基因 细胞标记 细胞分化 猪胎儿 |
| 收稿时间： | 2008-09-27; |
In vitro Differentiation of EGFP Gene Transfected Porcine Fetal Neural Stem Cells |
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| ZHENG Yue-mao,ZHAO Xue,HE Xiao-ying,QUAN Fu-sheng,LIU Jun,ZHANG Yong. In vitro Differentiation of EGFP Gene Transfected Porcine Fetal Neural Stem Cells[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2009, 42(9): 3305-3313. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.09.037 |
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| Authors: | ZHENG Yue-mao ZHAO Xue HE Xiao-ying QUAN Fu-sheng LIU Jun ZHANG Yong |
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| Affiliation: | (College of Veterinary Medicine, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi)
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | neural stem cells EGFP gene markers differentiation porcine fetus |
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