杏SSR-PCR反应体系中Taq酶的初步优化

Taq酶的浓度是PCR反应的主要影响因素之一。本文随机选择大杏梅等5个杏品种,提取DNA,并经检测后用于SSR-PCR实验。在20μl的PCR反应体系中,Taq酶浓度设0.5U、1.0U和2.0U三个梯度,其它因素不变。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,当Taq酶浓度为0.5U时,有2个品种不能扩增出特异性条带;当Taq酶浓度为1.0U时,只有1个品种无扩增条带;当Taq酶浓度为2.0U时,所有品种均能扩增出条带,但同时会产生杂带。因此,在20μl杏SSR-PCR反应体系中,Taq酶浓度的适宜范围为1U-2U。