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| 禽流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 李娜,张保平,秦爱建. 禽流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J]. 安徽农业科学, 2011, 39(28): 17330-17331,17333 |
| 作者姓名： | 李娜 张保平 秦爱建 |
| 作者单位： | 1. 湖南文理学院生命科学学院,湖南常德,415000 2. 常德职业技术学院生物工程系,湖南常德,415000 3. 扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室,江苏扬州,225009 |
| 基金项目： | 湖南文理学院硕士启动科研项目(JJQD06022); 2010年度湖南省高校创新平台开放基金项目(10K043); 湖南省重点建设学科(动物学)资助; 湖南省高校产学研究合作示范基地——水生生物资源与利用项目资助; 水生生物资源保育与利用省高校科技创新团队资助 |
| 摘 要： | 采用饱和硫酸铵初步纯化的兔抗AIV-H9高免血清中的IgG作为包被抗体,利用抗AIV-NP-7B4单抗作为ELISA的第二抗体,建立了检测禽流感病毒（AIV）抗原的双抗体夹心ELISA方法。经方阵滴定试验测定反应的最佳工作条件：兔抗AIV-H9高免血清IgG包被稀释度为1：8000（浓度为3.531μg/ml）,抗AIV-NP-7B4单抗腹水最佳使用稀释度为1：800,酶标二抗的工作浓度为1：4000。与其他禽易感病毒（NDV、IBV、EDS-76V）等均没有交叉反应。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,可应用于AIV的检测和流行病学调查。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA |
Preliminary Establishment of the Double-antibody Sandwich ELISA for AIV |
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| LI Na et al. Preliminary Establishment of the Double-antibody Sandwich ELISA for AIV[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2011, 39(28): 17330-17331,17333 | |
| Authors: | LI Na et al |
| Affiliation: | LI Na et al(Department of Life Sciences,Hunan University of Arts and Science,Changde,Hunan 415000) |
| Abstract: | A double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(DAS-ELISA) for detecting avian influenza viruses was developed.In this method,the microplates were coated by IgG of rabbit polyclonal antibodies against AIV-H9 at the concentration of 3.531 μg/ml(1:8 000).Primary antibody of Mab-7B4 with 1:800 dilutions and antibody-HRP of 1:4 000 dilutions gave the best result.No cross-reaction was observed with NDV,IBV,and EDS-76V.All of these results showed that DAS-ELISA method was quick,sensitive and repeatable,which was applicable to the detection of AIV and epidemiological investigation. |
| Keywords: | Avian influenza viruses Monoclonal antibody Double-antibody sandwich ELISA |
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