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| 油茶cDNA-AFLP技术反应体系建立的研究 | |
| 引用本文： | 谢一青,黄勇,卓仁英,李志真,姚小华.油茶cDNA-AFLP技术反应体系建立的研究[J].分子植物育种,2013(5). |
| 作者姓名： | 谢一青 黄勇 卓仁英 李志真 姚小华 |
| 作者单位： | 1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所，富阳，311400; 福建省林业科学研究院，福州，350012 2. 福建省林业科学研究院，福州，350012 3. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所，富阳，311400 |
| 基金项目： | 国家科技支撑项目，福建省科技厅项目，福建省林木种苗科技攻关项目(闽林科 |
| 摘 要： | 以小果油茶和普通油茶的嫩叶及种仁为材料，对影响其cDNA-AFLP反应体系的关键因子进行优化分析，筛选出适合油茶的cDNA-AFLP反应体系。结果表明：分别用EASYspin Plus植物RNA快速提取试剂盒和Trizol法能成功获得高质量的油茶嫩叶和种仁总RNA；从总RNA中分离的mRNA经合成双链cDNA后，用限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ在37℃下5 h内酶切完全，经5 U T4连接酶16℃连接的产物稀释10倍后可直接用于预扩增；在20μL选择性扩增体系中，以预扩增产物稀释30倍为模版、dNTP (10 mmol/L)1.5μL、引物(10μmol/L)1.0μL、Taq酶用量1.25 U时的扩增效果较好。利用优化体系成功筛选出61对可以获得带型丰富且重复性好的引物组合。差异片段回收及PCR检测的结果表明，优化后的cDNA-AFLP分析体系适用于油茶相关差异基因的表达研究。 |
| 关 键 词： | 油茶 cDNA-AFLP 体系优化 引物筛选 |
Establish a cDNA-AFLP Technology System in Camellia oleifera |
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| Xie Yiqing , Huang Yong , Zhuo Renying , Li Zhizhen , Yao Xiaohua.Establish a cDNA-AFLP Technology System in Camellia oleifera[J].Molecular Plant Breeding,2013(5). | |
| Authors: | Xie Yiqing Huang Yong Zhuo Renying Li Zhizhen Yao Xiaohua |
| Abstract: | |
| Keywords: | Camellia oleifera cDNA-AFLPR System optimization Primer selection |
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