| 鉴别H5亚型两种分支禽流感病毒双重实时荧光RT-PCR方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 彭程,刘朔,张琳,李金平,于晓慧,侯广宇,王静静,李阳,蒋文明,刘华雷. 鉴别H5亚型两种分支禽流感病毒双重实时荧光RT-PCR方法的建立及应用[J]. 中国动物检疫, 2021, 38(1): 100-105 |
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| 作者姓名： | 彭程 刘朔 张琳 李金平 于晓慧 侯广宇 王静静 李阳 蒋文明 刘华雷 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2017YFC1200503） |
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| 摘 要： | 为准确区分H5亚型禽流感病毒2.3.2.1分支和2.3.4.4分支的毒株,通过对GenBank和GISAID数据库中发表的以及本实验室保存的H5亚型禽流感病毒HA基因序列进行比对,设计1对特异性引物和2条探针,建立了区分H5亚型禽流感病毒不同分支毒株的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法的反应体系和反应参数进行了优化,同时开展了特异性和敏感性试验,以及临床应用检测。结果显示:该方法具有良好的特异性,与其他亚型禽流感病毒及常见禽病病毒无交叉反应;对H5亚型禽流感病毒2.3.2.1分支和2.3.4.4分支毒株的检测灵敏度分别为495.0 copies/μL和22.3 copies/μL;100份临床家禽拭子禽流感病毒检测结果与常规RT-PCR和病毒分离检测结果一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异、敏感、准确、耗时少,同时还可区分不同分支,可应用于H5亚型禽流感病毒的准确、快速检测。
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| 关 键 词： | H5亚型禽流感病毒；分支；双重实时荧光RT-PCR；敏感性；特异性 |
Establishment and Application of a Duplex Real-time RT-PCR Assay for Identifying Two Branches of H5 Subtype Avian Influenza Virus |
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| Peng Cheng,Liu Shuo,Zhang Lin,Li Jinping,Yu Xiaohui,Hou Guangyu,Wang Jingjing,Li Yang,Jiang Wenming,Liu Hualei. Establishment and Application of a Duplex Real-time RT-PCR Assay for Identifying Two Branches of H5 Subtype Avian Influenza Virus[J]. China Animal Health Inspection, 2021, 38(1): 100-105 |
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| Authors: | Peng Cheng Liu Shuo Zhang Lin Li Jinping Yu Xiaohui Hou Guangyu Wang Jingjing Li Yang Jiang Wenming Liu Hualei |
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