| 牛源多杀性巴氏杆菌PlpE蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 张智,刘泽,乌吉斯古楞,刘重阳,权璞宏,任旭荣,宋庆庆,关平原.牛源多杀性巴氏杆菌PlpE蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].中国动物检疫,2021,38(1):94-99. |
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| 作者姓名： | 张智 刘泽 乌吉斯古楞 刘重阳 权璞宏 任旭荣 宋庆庆 关平原 |
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| 摘 要： | 为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG进行诱导,对诱导蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定;使用纯化蛋白PlpE免疫北京大耳白兔,制备多克隆抗体,并进行间接ELISA和Western Blot分析。结果显示,扩增的PlpE基因大小为1 050 bp,在原核细胞中诱导表达的PlpE蛋白约56 kDa。间接ELISA结果显示,所制备多克隆抗体效价可达1:512 000;Western Blot结果显示,所制备多克隆抗体反应性良好。PlpE蛋白的成功表达和多克隆抗体的成功制备,为下一步多杀性巴氏杆菌诊断方法的建立和疫苗研发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 多杀性巴氏杆菌 原核表达 PlpE基因 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression of PlpE Protein of Bovine Pasteurella multocida and Preparation of Polyclonal Antibodies |
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| Zhang Zhi,Liu Ze,Wujisiguleng,Liu Chongyang,Quan Puhong,Ren Xurong,Song Qingqing,Guan Pingyuan.Prokaryotic Expression of PlpE Protein of Bovine Pasteurella multocida and Preparation of Polyclonal Antibodies[J].China Journal Of Animal Quarantine,2021,38(1):94-99. |
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| Authors: | Zhang Zhi Liu Ze Wujisiguleng Liu Chongyang Quan Puhong Ren Xurong Song Qingqing Guan Pingyuan |
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