| 禽腺病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 宋玲玲,于可响,王友令,马秀丽,袁小远,刘涛,鞠艳,亓丽红,艾武.禽腺病毒4型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2019(8):118-122. |
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| 作者姓名： | 宋玲玲 于可响 王友令 马秀丽 袁小远 刘涛 鞠艳 亓丽红 艾武 |
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| 作者单位： | 山东省农业科学院家禽研究所 |
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| 摘 要： | 禽腺病毒4型(FAdV-4)是心包积水综合征的重要病原。本研究拟建立FAdV4荧光定量PCR检测方法,为FAdV4感染的流行病学调查、早期诊断、疫病净化提供技术手段。根据GenBank中的禽腺病毒4型六邻体(hexon)基因序列,设计一对引物,扩增hexon基因,将目的基因与载体pEASY-T3连接,构建重组阳性质粒pEAST-T3-H,利用所制备的质粒pEAST-T3-H为模板,对PCR反应体系、反应条件进行优化。建立了禽腺病毒4型SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,检出的标准品的敏感性为1.7×10拷贝/μL,优于常规的PCR检测方法。该方法与其他禽病病毒均无交叉反应。表明该方法具有特异型强、灵敏度高、重复性好的特点,可用于临床样本的检测。
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| 关 键 词： | 禽腺病毒 血清型4 实时荧光定量PCR 检测 |
Establishment of real time quantitative PCR assay for detection of avian adenovirus type 4 |
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