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罗非鱼无乳链球菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立
引用本文:张新艳.罗非鱼无乳链球菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].福建农业学报,2014,29(6).
作者姓名:张新艳
作者单位:福建省淡水水产研究所,福建福州,350002
基金项目:福建省海洋与渔业厅重点项目,福建省海洋与渔业科技项目,现代农业产业技术体系建设专项,福建省科技厅重点项目
摘    要:通过杂交瘤技术制备抗罗非鱼无乳链球菌SIP融合蛋白单克隆抗体2株:1C9和6G5,均为IgM,效价分别为10-5和10-4,间接ELISA结果显示单克隆抗体1C9对无乳链球菌具有良好的检测特异性和灵敏性;同时制备兔抗罗非鱼无乳链球菌SIP融合蛋白多克隆抗体及其HRP酶标记物,兔抗SIP蛋白多克隆抗体的效价为10-6,经标记的抗体效价为10-4,最佳抗体工作浓度为1:400.建立双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测罗非鱼无乳链球菌的方法,具良好的特异性,检测灵敏度为0.85×106 CFU· mL-1.双抗体夹心ELISA检测实际应用结果与双重PCR检测比较,相对符合率为98.33%,检测结果可靠性高.

关 键 词:罗非鱼  无乳链球菌  SIP蛋白  单克隆抗体  DAS-ELISA

Establishment of DAS-ELISA Detection for Streptococcus agalaciate in Tilapia
ZHANG Xin-yan.Establishment of DAS-ELISA Detection for Streptococcus agalaciate in Tilapia[J].Fujian Journal of Agricultural Sciences,2014,29(6).
Authors:ZHANG Xin-yan
Abstract:
Keywords:tilapia  Streptococcus agalaciate  SIP  McAb  DAS-ELISA
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