蝙蝠TRAIL基因的克隆·表达及生物学功能分析 |
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引用本文: | 裴丽丽,侯欢欢,卢佳,闫伟莉,任文华. 蝙蝠TRAIL基因的克隆·表达及生物学功能分析[J]. 安徽农业科学, 2015, 0(22): 83-86. DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.22.032 |
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作者姓名: | 裴丽丽 侯欢欢 卢佳 闫伟莉 任文华 |
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作者单位: | 1. 南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046;南京医科大学康达学院,江苏连云港222000;2. 南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31370401),江苏省高校优势学科建设工程项目 |
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摘 要: | [目的]克隆蝙蝠TRAIL基因,构建蝙蝠可溶性TRAIL原核表达栽体,研究其对肿瘤细胞凋亡的影响.[方法]通过RT-PCR技术克隆蝙蝠TRAIL的全长cDNA序列,实时荧光定量PCR鉴定其组织分布,将其可溶性片段与表达载体pET43.1a连接,并在大肠杆菌BL21中高效表达和纯化,通过western blotting证实.体外,通过MTT、TrypanBlue和流式细胞术检测纯化的可溶性TRAIL蛋白能否诱导肿瘤细胞的凋亡.[结果]成功克隆蝙蝠TRAIL基因,构建了重组表达载体,获得可溶性TRAIL蛋白.体外试验证明,可溶性蝙蝠TRAIL蛋白能够诱导Jurkat细胞和HeLa细胞的凋亡.[结论]可溶性蝙蝠TRAIL蛋白可诱导肿瘤细胞凋亡,该研究为蝙蝠免疫系统的研究奠定了基础.
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关 键 词: | TRAIL 蝙蝠 荧光实时定量PCR 细胞凋亡 |
The Cloning,Expression and Biological Function of the Bat TRAIL Gene |
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Abstract: | |
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Keywords: | TRAIL Pipistrellus javanicus Real-time PCR Apoptosis |
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