| 玉米内州萎蔫病菌LAMP快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 单长林,李雪松,李孝军,周圆,杨赛军,王健,张建成.玉米内州萎蔫病菌LAMP快速检测方法的建立[J].安徽农业科学,2015(22). |
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| 作者姓名： | 单长林 李雪松 李孝军 周圆 杨赛军 王健 张建成 |
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| 作者单位： | 1. 舟山出入境检验检疫局,浙江舟山,316000;2. 嘉兴出入境检验检疫局,浙江嘉兴,314000 |
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| 基金项目： | 浙江检验检疫局科研项目(ZK201227)，浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目(2009C12054)，浙江省科技厅公益技术研究农业项目(2013C32002) |
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| 摘 要： | 目的]建立玉米内州萎蔫病菌的快速恒温扩增检测技术.方法]利用GenBank公布的玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis,Cmn)16S-23S序列设计LAMP(loop-mediated isothermal amplification)引物,建立玉米内州萎蔫病菌LAMP检测体系,并对反应条件进行了优化.结果] LAMP在内引物、环化引物和外引物比为6∶4∶1(30 pmol∶20 pmol∶5 pmol)的25山体系下64℃反应30 min为最佳反应条件,且LAMP引物能从供试的7种菌株中特异性扩增出Cmn梯度性条带.以玉米内州萎蔫病菌基因组和菌悬液梯度稀释液为模板检测LAMP体系的灵敏度,结果显示,LAMP检测体系针对基因组和菌悬液的灵敏度分别达到了50fg和3.6CFU,比普通PCR灵敏度高100倍.结果]LAMP检测体系简单、快速、灵敏度高、特异性好,在玉米内州萎蔫病菌检测方面潜力巨大.
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| 关 键 词： | 玉米内州萎蔫病菌 LAMP 检测 |
The Establishment of a Rapid Detection Method of Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis LAMP |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Clavibacter michiganensis subsp nebraskensis LAMP Detection |
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