鲤胰岛素样生长因子Ⅱ的克隆表达与抗体制备 |
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作者姓名: | 商汉桥 罗晓松 邹世平 伍晓雄 吴小平 龙良启 |
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作者单位: | 华中农业大学,武汉,430070;华中农业大学,武汉,430070;中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北荆州,434000 |
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基金项目: | 农业部农业结构调整技术研究专项基金 |
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摘 要: | 从鲤(Cyprinus carpio)肝脏总RNA中成功地克隆和诱导表达了胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因,并用间接ELISA法和Western-blot对其融合蛋白的多克隆抗体的效价和特异性进行了分析。结果表明,克隆的鲤IGF-Ⅱ基因与已报道的序列相比,有1个位点发生同义突变;经SDS-PAGE电泳分析,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体总量的35%。经ELISA测定,制备的抗体效价为6400。Western blot分析表明,抗血清能与重组蛋白发生特异性反应
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关 键 词: | 鲤(Cyprinus carpio) 胰岛素样生长因子-Ⅱ 克隆 原核表达 多克隆抗体 |
文章编号: | 1000-6907-(2007)06-0065-04 |
修稿时间: | 2007-03-28 |
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