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| 鸡胚原始生殖细胞的冷冻保存和体外培养 | |
| 引用本文： | 肖小珺,秦洁,蔡琳琳,李碧春. 鸡胚原始生殖细胞的冷冻保存和体外培养[J]. 中国兽医学报, 2005, 25(3): 316-319 |
| 作者姓名： | 肖小珺 秦洁 蔡琳琳 李碧春 |
| 作者单位： | 1. 扬州大学,畜牧兽医学院,江苏,扬州,225009;湖州师范学院,生命科学学院,浙江,湖州,313000 2. 扬州大学,畜牧兽医学院,江苏,扬州,225009 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30170678) |
| 摘 要： | 采用Ficoll密度梯度离心,提取第19期(孵化72h)鸡受精蛋性腺中的原始生殖细胞(primordialgermcells,PGCs),用不同的冷冻保护液对PGCs采用提纯后直接冷冻保存和在培养体系中培养24h后再进行冷冻保存,7d后复苏,用台盼蓝染色检测其存活率,并用PAS染色对冷冻后的PGCs进行特异性鉴定。复苏后的PGCs在培养体系中培养5d后,更换为培养体系继续培养,进行体外分化试验。结果如下分离后直接进行冷冻保存的PGCs复苏后存活率最高为(85.93±1.24)%;复苏后的PGCs在培养体系中培养48h后进行了PAS染色鉴定,结果PGCs呈PAS阳性(细胞核不着色,细胞质呈红色),表明PGCs的染色特性没有因冷冻保存和体外培养而发生改变;复苏后的PGCs在培养体系中培养可形成细胞克隆,当把PGCs更换到培养体系培养5d后,PGCs克隆有的仍保持克隆状态,但体积缩小,克隆中细胞排列紧密,颜色较深,有的克隆由鸟巢状变为不规则形,且在克隆周围形成类神经细胞样细胞。而经体外培养后再进行冷冻保存的PGCs,复苏后存活率最高为(42.26±1.36)%。 |
| 关 键 词： | 原始生殖细胞 冷冻保存 体外培养 PGCs 培养体系 鸡胚 密度梯度离心 冷冻保护液 台盼蓝染色 特异性鉴定 存活率 PAS 体外分化 染色鉴定 染色特性 细胞克隆 神经细胞 复苏 受精蛋 细胞核 细胞质 不规则 孵化 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)03-0316-04 |
| 修稿时间： | 2003-10-27 |
Cryopreservation and Culture of Chicken Primordial Germ Cells at Stage 19 |
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| XIAO Xiao-jun,QIN Jie,CAI Lin-lin,LI Bi-chun. Cryopreservation and Culture of Chicken Primordial Germ Cells at Stage 19[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2005, 25(3): 316-319 | |
| Authors: | XIAO Xiao-jun QIN Jie CAI Lin-lin LI Bi-chun |
| Affiliation: | XIAO Xiao-jun~1,2,QIN Jie~1,CAI Lin-lin~1,LI Bi-chun~1* |
| Abstract: | |
| Keywords: | chicken primordial germ cells cryopreservation culture in vitro |
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