牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立 |
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引用本文: | 张康,王丹阳,王旭荣,张凯,张景艳,王磊,李建喜.牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立[J].中国奶牛,2018(10). |
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作者姓名: | 张康 王丹阳 王旭荣 张凯 张景艳 王磊 李建喜 |
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作者单位: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/甘肃省中兽药工程技术研究中心 |
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摘 要: | 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了BVDV的RT-PCR检测方法。该方法从BVDV标准毒株NADL中扩增出了279bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞等的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1×TCID50。提取9份细胞毒总RNA后,进行一步法RT-PCR扩增可获得一致的检测结果,说明该方法重复性很好。应用该方法对45份临床疑似患牛的样品进行检测,结果检出4份阳性,表明该方法具有较好的临床应用性,且检测结果与参考实验室检测结果完全相符,可用于BVDV的快速诊断。
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