| 应用竞争PCR检测丙酸盐对体外培养牛肝细胞丙酮酸羧化酶mRNA水平的影响 |
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| 引用本文： | 徐闯,夏成,刘国文,王哲,李家奎,张乃生,王兴龙,欧阳红生,张永亮.应用竞争PCR检测丙酸盐对体外培养牛肝细胞丙酮酸羧化酶mRNA水平的影响[J].中国兽医学报,2005,25(4):397-399,402. |
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| 作者姓名： | 徐闯 夏成 刘国文 王哲 李家奎 张乃生 王兴龙 欧阳红生 张永亮 |
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| 作者单位： | 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30230620) |
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| 摘 要： | 根据牛肝细胞内PC(丙酮酸羧化酶)基因组与PCcDNA相比多含有一个内含子序列．在其中再插入一外源DNA序列．从而使最终构建的突变体片段的长度大于PCcDNA的长度，成功构建了PCcDNA的竞争DNA模板，然后应用竞争PCR方法研究了丙酸盐对体外培养新生牛单层肝细胞PCmRNA水平的影响。使单层肝细胞培养液中丙酸钠浓度分别为0、1．5、2．5、3．5、4．5、8．5、11．5mmol／L，处理24h，提取总RNA、逆转录，在同一体系中用相同引物扩增目的带和竞争模板带。结果表明．随着丙酸钠浓度的升高．PCmRNA水平呈上升趋势，提示肝细胞内PCmRNA的表达水平受培养液中丙酸钠浓度的影响。
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| 关 键 词： | 丙酮酸羧化酶mRNA 竞争PCR 肝细胞 内含子 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)04-0397-03 |
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