基因Ⅶ.2亚型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用

基因Ⅶ型新城疫病毒（NDV）是严重危害我国家禽养殖业健康发展的主要病原之一。国家新城疫参考实验室监测表明，目前国内NDV流行毒株已由基因Ⅶ.1.1亚型转变为Ⅶ.2亚型。为实现基因Ⅶ.2亚型NDV的快速检测和精准定量，针对其国内流行毒株F基因保守区域设计了特异性引物和探针，建立了一种可快速检测基因Ⅶ.2亚型NDV的反转录数字PCR(RT-dPCR)方法，并评估了该方法的敏感性、特异性和重复性。结果显示：建立的RT-dPCR方法检测下限为1.30 copies/μL，敏感性较高；特异性强，与基因Ⅵ型、Ⅻ型NDV以及其他常见禽病病毒（禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒和禽腺病毒）无交叉反应；重复性试验变异系数为2.6%，小于3%，重复性好。利用本方法对从活禽市场采集的200份鸡口咽/泄殖腔拭子样品进行检测，发现检测结果与病毒分离鉴定结果一致。结果表明，本研究建立的RT-dPCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和准确性，可用于基因Ⅶ.2亚型NDV的快速检测和精准定量，同时也为其核酸标准物质的研制奠定了基础。

Establishment and Application of RT-dPCR for Gene VII.2 Subtype Newcastle Disease virus