基于TaqMan MGB探针的可可花瘿病菌快速检测方法 |
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引用本文: | 吕 燕,郭立新,段维军.基于TaqMan MGB探针的可可花瘿病菌快速检测方法[J].植物保护,2022,48(5):220-226. |
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作者姓名: | 吕 燕 郭立新 段维军 |
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作者单位: | 1. 宁波检验检疫科学技术研究院, 宁波 315012; 2. 宁波中盛产品检测有限公司, 宁波 315012; 3. 宁波海关, 宁波 315012 |
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基金项目: | 国家重点研发计划(2022YFF0608804); 国家自然科学基金(NSFC31770009); 浙江省公益技术研究项目(LGF20C140001); 海关总署科研项目(2020HK162); 宁波市社会公益科研项目(2022S010) |
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摘 要: | 可可花瘿病菌是一种我国进境植物检疫性真菌?本文根据可可花瘿病菌EF1α基因的保守序列, 设计并合成1对特异性的实时荧光PCR引物和1条TaqMan MGB探针, 建立了可可花瘿病菌的实时荧光PCR检测方法?特异性试验结果表明, 该检测方法能够特异性检出可可花瘿病菌; 实时荧光PCR优化反应条件为引物终浓度0.2 μmol/L, 探针终浓度0.6 μmol/L; 灵敏度试验结果表明, 20 μL反应体系中可可花瘿病菌DNA含量最低检测限为10 pg; 重复性试验结果表明, 该检测方法的重复性和稳定性良好; 接种试验样品检测结果表明, 该方法可用于疑似携带可可花瘿病菌样品的检测与初筛?本文建立的方法具有良好的灵敏性?特异性和应用性, 为可可花瘿病菌早期快速检测提供了一种有效手段?
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关 键 词: | 可可花瘿病菌 实时荧光PCR 检测 TaqMan MGB探针 |
收稿时间: | 2021/9/16 0:00:00 |
修稿时间: | 2021/11/24 0:00:00 |
Development of TaqMan MGB fluorescent real-time PCR assay for detection of Albonectria rigidiuscula |
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Institution: | 1. Ningbo Academy of Inspection and Quarantine, Ningbo 315012, China; 2. Ningbo Joysun Product Testing Service Company, Ningbo 315012, China; 3. Ningbo Customs, Ningbo 315012, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Albonectria rigidiuscula real-time fluorescent PCR detection TaqMan MGB probe |
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