| 引起浙贝母黑斑病的交链格孢单抗及检测试纸条的制备 |
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| 作者姓名： | 温思思 赵福运 郭飘逸 徐云飞 赵伟春 |
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| 作者单位： | 浙江中医药大学, 杭州 310053 |
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| 基金项目： | 浙江省基础公益研究计划(LGN21C140004, 2015C32076); 浙江省中医药科技计划(2020B060) |
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| 摘 要： | 浙贝母黑斑病是危害浙贝母茎叶的重要真菌性病害之一, 该病侵染叶片产生叶斑?叶枯, 严重时全株枯死?本研究制备了针对浙贝母黑斑病致病菌交链格孢Alternaria alternata的单克隆抗体(单抗), 并开发了胶体碳免疫层析试纸条用于黑斑病早期精准检测?以交链格孢提取液免疫Bal b/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备单抗, 间接ELISA法和Western blot分析单抗的效价?灵敏度?特异性?抗体类型及结合蛋白?以双抗夹心法制备胶体碳免疫层析试纸条?得到3种针对交链格孢的单抗及其杂交瘤细胞株AaA1?AaC2和AaC5?3种单抗对交链格孢均具有高度特异性, 灵敏度为12.21~24.41 ng/mL, 效价≥6.40×105, 抗体类型分别为IgG2a?IgG3和IgG3, 结合蛋白的分子量分别为37?62 kDa和66 kDa?以AaA1为碳标单抗, AaC2为划膜单抗的胶体碳试纸条检测交链格孢的方法快速简便?准确灵敏?经济环保?从田间采样到出结果用时少于15 min, 样品简单研磨后取汁液加入加样孔即完成全部操作, 对交链格孢抗原的检测灵敏度为6.25 μg/mL, 试纸条采用环保材料制备, 单个试纸条的成本约1.7元?
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| 关 键 词： | 浙贝母 黑斑病 交链格孢 单克隆抗体 试纸条 |
| 收稿时间： | 2021-08-08 |
| 修稿时间： | 2021-11-08 |
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