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绵羊肺炎支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:程振涛,张双翔,王 慧,周碧君,王开功,文 明. 绵羊肺炎支原体实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 西北农业学报, 2013, 22(2): 7-12
作者姓名:程振涛  张双翔  王 慧  周碧君  王开功  文 明
作者单位:(1.贵州大学 动物科学学院,贵阳 550025;2.贵州省动物疫病研究室,贵阳 550025)
基金项目:贵州省自然科学技术基金(黔科合J字[2011]2332号);黔西南州种草养羊产业发展省州科技合作专项项目 (黔西南科合[2012]5号);贵州大学引进人才科研项目(贵大人基合字[2010]35号);贵州省农业科技攻关项目 (黔科合NY字[2011]3105号);贵州省科技厅重点实验室项目[2011]4008号。
摘    要:为研究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)侵害山羊的组织嗜性、筛选其最佳培养基及建立快速检测方法,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,以Mo Y98株16S rRNA基因重组质粒pMD19 MoFQ为模板,通过优化反应体系构建标准曲线,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因的FQ PCR方法,并对所建方法进行重复性、特异性、敏感性及应用性检测。结果表明,所建Mo 16S rRNA基因检测FQ PCR方法具有较好的重复性、特异性、临床应用性,Mo核酸拷贝最低检出量可至10 μL-1。该方法不仅可作为Mo临床检测方法,且为后续Mo研究工作提供技术支持。

关 键 词:绵羊肺炎支原体;实时荧光定量PCR;方法;建立

Establishment of Real time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Mycoplasma ovipneumoniae
CHENG Zhentao,ZHANG Shuangxiang,WANG Hui,ZHOU Bijun,WANG Kaigong and WEN Ming. Establishment of Real time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Mycoplasma ovipneumoniae[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2013, 22(2): 7-12
Authors:CHENG Zhentao  ZHANG Shuangxiang  WANG Hui  ZHOU Bijun  WANG Kaigong    WEN Ming
Abstract:
Keywords:
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