| 香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 张亮,史雨红,陈炯,陆新江,李明云. 香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定[J]. 水产科学, 2011, 30(1) |
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| 作者姓名： | 张亮 史雨红 陈炯 陆新江 李明云 |
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| 作者单位： | 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,浙江,宁波,315211 |
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| 基金项目： | 长江学者和创新团队发展计划项目(IRT0734) |
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| 摘 要： | 以香鱼正常肝胰腺为材料,构建cDNA文库。初始文库库容大于1.3×107cfu/ml,扩增文库的滴度大于1.1×106cfu/ml,平均插入片段约为1.0 kb。从文库中随机挑选297个cDNA克隆测序,得到232个功能已知EST序列,功能包括代谢、蛋白质合成、细胞与机体防御、信号转导以及细胞结构与运动等5个方面。随机测序获得香鱼弹性蛋白酶(Elastase,ELA)编码序列,cDNA序列全长957个核苷酸,3’-末端具有polyA尾,编码一个由268个氨基酸组成28.7 ku大小蛋白。序列分析表明,香鱼ELA的N端15个氨基酸为信号肽,成熟肽具有丝氨酸蛋白酶家族的典型结构特征。香鱼ELA与斜带石斑鱼、大西洋鳕和金头鲷的ELA氨基酸序列同源性最高,达76%~77%。系统进化树分析表明,香鱼ELA与其他鱼类ELA紧密成簇。RT-PCR检测显示,香鱼ELA基因mRNA在香鱼肝胰腺、脾、肠组织中均大量表达。
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| 关 键 词： | cDNA文库 香鱼 肝胰腺 弹性蛋白酶 序列分析 |
Construction and Characterization of a cDNA Library in Hepatopancreas of Ayu Plecoglossus altivelis |
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| ZHANG Liang,SHI Yu-hong,CHEN Jiong,LU Xin-jiang,LI Ming-yun. Construction and Characterization of a cDNA Library in Hepatopancreas of Ayu Plecoglossus altivelis[J]. Fisheries Science, 2011, 30(1) |
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| Authors: | ZHANG Liang SHI Yu-hong CHEN Jiong LU Xin-jiang LI Ming-yun |
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| Affiliation: | ZHANG Liang,SHI Yu-hong,CHEN Jiong,LU Xin-jiang,LI Ming-yun(Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology,Ministry of Education,Ningbo University,Ningbo 315211,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cDNA library ayu hepatopancrease elastase sequence analysis |
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