| 小反刍兽疫病毒液滴式数字PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 苏佳,赵炜,刘伟洁,白洪旭,陈延飞,孙淼,吴华伟,薛青红,陈晓春.小反刍兽疫病毒液滴式数字PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽药杂志,2024,58(5):17-25. |
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| 作者姓名： | 苏佳 赵炜 刘伟洁 白洪旭 陈延飞 孙淼 吴华伟 薛青红 陈晓春 |
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| 作者单位： | 中国兽医药品监察所,,,,,,,,中国兽医药品监察所 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划动物疫病口岸检疫与风险防范技术研发及应用(2021YFD1800500) |
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| 摘 要： | 为实现小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus，PPRV)的快速、准确、定量检测，以国内PPRV Clone 9疫苗株N基因为靶位点设计特异性引物及探针，建立了液滴式数字PCR(Droplet digital PCR，ddPCR)方法，并对其特异性、敏感性及重复性进行评价。将所建立的ddPCR方法与实时荧光定量PCR(Fluorescence quantitative PCR，qPCR)方法的灵敏度进行比较分析并应用于PPRV(Clone 9株)核糖核酸标准物质的定量。结果显示，所建立的ddPCR方法特异性好，仅PPRV检测结果为阳性，其他羊源病毒类生物制品及毒种检测结果均为阴性；敏感性高，基因拷贝数检出限度为4.33拷贝/μL，比qPCR方法的灵敏度(57.3拷贝/μL)高10倍；重复性好，重复性试验的变异系数为1.8%；定量准确，具有一定资质的9家单位各组测量数据组间变异系数小于5%。试验建立的ddPCR方法能够有效地对PPRV核酸进行快速检测，为PPRV的诊断及绝对定量提供了有效方法。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 液滴式数字PCR 荧光定量PCR 检测 |
| 收稿时间： | 2023/11/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2023/12/11 0:00:00 |
Establishment and Application of a Droplet Digital PCR Assay for Detection of Peste des Petits Ruminants Virus |
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| Institution: | China Institute of Veterinary Drug Control,,,,,,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Peste des petits ruminants virus droplet digital PCR fluorescence quantitative PCR detection |
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