| 鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞表位的鉴定 |
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| 引用本文： | 宋扬,韩宗玺,邵昱昊,孔宪刚,刘胜旺.鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞表位的鉴定[J].中国预防兽医学报,2010,32(5). |
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| 作者姓名： | 宋扬 韩宗玺 邵昱昊 孔宪刚 刘胜旺 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 十一五国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)B细胞抗原表位,本研究将IBV致弱株CK/CH/LDL97Ⅰ病毒与重组N蛋白作为免疫原,交叉免疫BALB/c小鼠,制备了1株抗IBV N蛋白的单克隆抗体(MAb)6D10。Westernblot结果表明该MAb可特异性的识别IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株和重组N蛋白。同时利用噬菌体展示技术对IBV N蛋白抗原表位进行筛选,获得11个阳性噬菌体克隆。序列分析表明,这11个克隆均展示有"FGPRTK"6个氨基酸的序列,对应于IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株N蛋白242位～247位氨基酸残基。同时,通过人工合成其编码序列并进行原核表达,利用MAb6D10对表达产物进行western blot分析,反应性良好。由此表明"FGPRTK"6肽为IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株的一个线性B细胞抗原表位。表位的保守性分析结果表明,本研究鉴定的表位在各种血清型IBV毒株中均高度保守。本研究结果为进一步研究IBV N蛋白抗原的结构和功能及诊断试剂的研发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 传染性支气管炎病毒 N蛋白 单克隆抗体 噬菌体展示 抗原表位 |
Preparation of the monoclonal antibody and epitope identification of infectious bronchitis virus N protein |
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| SONG Yang,HAN Zong-xi,SHAO Yu-hao,KONG Xian-gang,LIU Sheng-wang.Preparation of the monoclonal antibody and epitope identification of infectious bronchitis virus N protein[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(5). |
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| Authors: | SONG Yang HAN Zong-xi SHAO Yu-hao KONG Xian-gang LIU Sheng-wang |
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