| 烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 王秀敏,吴云锋,成巨龙.烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2006,34(6):124-127. |
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| 作者姓名： | 王秀敏 吴云锋 成巨龙 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,植保学院,植物病毒研究室,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100
2. 陕西省烟草研究所,陕西,西安,710003 |
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| 基金项目： | 陕西省烟草专卖局资助项目;西北农林科技大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 根据烟草蚀纹病毒(TEV)CP序列设计合成上下游引物,利用RT-PCR方法获得了TEV CP基因,大小为789 bp。将TEV CP基因克隆到pM D 18-T S im p le V ector,经E coRⅠ/S acⅠ双酶切得到目的片段,并将其定向插入到pET 30a载体中构建了原核表达载体pET 30-TEV CP,重组质粒经E coRⅠ和S acⅠ双酶切鉴定及基因测序验证正确后,转化大肠杆菌BL 21,用IPTG进行诱导表达。结果表明,TEV CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,分子量约为37 ku。以表达产物为抗原免疫家兔,制备了特异性抗血清,其效价为1/1 204。W estern b lot检测结果表明,制备的抗血清可用于检测田间的发病植株。
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| 关 键 词： | 烟草蚀纹病毒 外壳蛋白基因 原核表达 抗血清 |
| 文章编号： | 1671-9387(2006)06-0091-04 |
| 收稿时间： | 2005-12-12 |
| 修稿时间： | 2005年12月12 |
Cloning of tobacco etch virus cp gene and prokaryotic expression in E.coli |
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| WANG Xiu-min,WU Yun-feng,CHENG Ju-long,ZHANG Jian-xin,YANG Dong,LUO Zhao-peng.Cloning of tobacco etch virus cp gene and prokaryotic expression in E.coli[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2006,34(6):124-127. |
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| Authors: | WANG Xiu-min WU Yun-feng CHENG Ju-long ZHANG Jian-xin YANG Dong LUO Zhao-peng |
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| Institution: | 1 (1 Plant Virology Laboratory of College of Plant Protection,Shaanxi Key Laboratory for Agriculture Molecule Biotechnology, Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China; 2 Shaanxi Tobacco Research Institute,Xi’an,Shaanxi 710003,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tobacco etch virus coat protein prokaryotic expression antiserum |
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