| 在体条件下miR-305-5p对日本沼虾MnCHT3A的靶向调控作用 |
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| 引用本文： | 岳凯迪,陈柯,杜鹃,吕艳杰,杨洪,宁黔冀.在体条件下miR-305-5p对日本沼虾MnCHT3A的靶向调控作用[J].水产学报,2021,45(11):1797-1803. |
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| 作者姓名： | 岳凯迪 陈柯 杜鹃 吕艳杰 杨洪 宁黔冀 |
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| 作者单位： | 河南师范大学生命科学学院，河南 新乡 453007 |
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| 基金项目： | 河南省自然科学基金(182300410033) |
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| 摘 要： | 为了探索miRNA对日本沼虾几丁质酶3A(Macrobrachium nipponense chitinase 3A,MnCHT3A)基因的调控作用,实验采用生物信息学方法预测并筛选与MnCHT3A靶向结合的miRNA—miR-305-5p;利用qRT-PCR、生物化学以及组织学方法,研究了在体条件下,miR-305-5p对靶基因的调控作用。结果显示,一个蜕皮周期中miR-305-5p与MnCHT3A的表达量呈负相关,前者C期最高、A期最低;而MnCHT3A的表达趋势则相反。注射miR-305-5p mimics和miR-305-5p inhibitor后,与对照组相比,MnCHT3A转录水平分别降低60%和升高166%;MnCHT酶活性分别降低39.53%和升高133%。组织学观察发现,C期的头胸甲表皮为3层结构,由外向内依次为上表皮、外表皮和内表皮(H.E染色);几丁质荧光染色结果显示,几丁质分布在内、外表皮;扫描电镜结果清晰显示了内、外表皮的板层结构。与对照组相比,miR-305-5p mimics组内表皮的板层厚度增加,呈蓝色荧光的几丁质条带有增厚趋势;而miR-305-5p inhibitor组表皮结构紊乱,几丁质荧光分布不均且部分区域明显减弱。研究表明,miR-305-5p的靶基因为MnCHT3A,在体条件下,miR-305-5p能够靶向抑制MnCHT3A的转录。
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| 关 键 词： | 日本沼虾 miRNA 几丁质酶3A 调控 |
| 收稿时间： | 2020/9/30 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/3/19 0:00:00 |
Targeted regulation of miR-305-5p on Macrobrachium nipponense MnCHT3A gene in vivo |
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| Institution: | College of Life Sciences, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Macrobrachium nipponense miRNA chitinase 3A regulation |
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