| 小反刍兽疫病毒核蛋白的原核表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 张雪,贾赟,孙铭英,张永宁,栾慎顺,刘钊,孙颖杰,包永明.小反刍兽疫病毒核蛋白的原核表达及免疫原性分析[J].中国农学通报,2016,32(23):27-31. |
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| 作者姓名： | 张雪 贾赟 孙铭英 张永宁 栾慎顺 刘钊 孙颖杰 包永明 |
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| 作者单位： | 辽宁出入境检验检疫局,辽宁出入境检验检疫局,辽宁出入境检验检疫局,中国检验检疫科学研究院,辽宁出入境检验检疫局,辽宁出入境检验检疫局,四川出入境检验检疫局,大连理工大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技支撑计划“外来与新发动物疫病筛查与鉴定技术研究与示范”(2013BAD12B01)；国家自然科学基金项目“NV蛋白介导HIRRV逃逸宿主RLRs抗病毒信号通路的分子机制”(41276174)。 |
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| 摘 要： | 为了获得小反刍兽疫病毒特异性抗原N蛋白,用于血清中抗小反刍兽疫病毒抗体检测方法的建立,根据Gen Bank中已发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白核苷酸序列,设计引物,扩增N基因。扩增片段通过NdeⅠ和HindⅢ酶切位点插入表达载体p ColdⅠ。重组蛋白通过p ColdⅠ载体转化,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了原核表达,经SDS-PAGE和Western Blotting检测表明,表达产物为58 k D的融合蛋白,可被PPRV感染动物血清识别,重组蛋白具有良好的反应原性。用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立了检测PPRV血清的间接ELISA方法,与国外标准ELISA试剂盒的符合率达98.3%,为建立快速检测小反刍兽疫病毒抗体的检测方法奠定了基础。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 N蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验 |
| 收稿时间： | 2016/1/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 7/1/2016 12:00:00 AM |
Expression and Bioactivity of Nucleoprotein from Peste des Petits Ruminants Virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | peste des petits ruminants virus (PPRV) nucleoprotein (N) gene prokaryotic expression indirect ELISA |
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