柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达 |
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引用本文: | 麦博,覃宗华,于三科,余劲术,吕敏娜,吴彩艳,林青,蔡建平.柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达[J].中国兽医科技,2007,37(9):751-755. |
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作者姓名: | 麦博 覃宗华 于三科 余劲术 吕敏娜 吴彩艳 林青 蔡建平 |
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基金项目: | 广东省自然科学基金重点项目(05103390) |
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摘 要: | 从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增&SAG10基因,与pGEM-TEasy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5a,筛选阳性克隆,扩增不舍N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a(+)和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a(+)-EtSAGIO在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2x-EtSAG10在E.coli Rosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。
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关 键 词: | 柔嫩艾美球虫 表面抗原10 基因克隆 表达 免疫 |
文章编号: | 1673-4696(2007)09-0751-05 |
收稿时间: | 2007-06-07 |
修稿时间: | 2007-08-09 |
Cloning and prokaryotic expression of the SAGIO gene encoding surface antigen 10 of Eimeria tenella Yangling strain |
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Abstract: | |
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Keywords: | Eimeria tenella surface antigen 10 gene cloning prokaryotic expression vaccination |
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