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结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达
引用本文:刘杨,宋纪伟,曾范利,时坤,李健明,杜锐.结核分支杆菌Rv3117基因的克隆与原核表达[J].动物医学进展,2015,36(5).
作者姓名:刘杨  宋纪伟  曾范利  时坤  李健明  杜锐
作者单位:1. 吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130118
2. 吉林市人民医院,吉林吉林,132001
3. 吉林农业大学中药材学院,吉林长春,130118
4. 吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;教育部动物生产及产品质量安全重点实验室,吉林省药用动物二级实验室,吉林长春130118
基金项目:国家科技支撑计划项目,国家自然科学基金项目,吉林省科技厅科技支撑计划项目,吉林省科技厅科技成果转化促进计划项目
摘    要:以结核分支杆菌H37Rv株染色体DNA为模板,应用Rv3117基因特异性引物对该基因进行PCR扩增,获得约800bp的DNA片段。将PCR纯化产物克隆至pMD-18T Vector中,构建出重组质粒pMD-18T-Rv3117。以EcoRⅠ和SamⅠ双酶切pMD-18T-Rv3117重组载体和pGEX-4T-1原核表达载体,并将纯化的Rv3117基因亚克隆至pGEX-4T-1中,构建出原核重组表达质粒pGEX-4T-1-Rv3117。将pGEX-4T-1-Rv3117重组质粒转化至感受态E.coli BL21中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约30ku目的蛋白带。Western blot分析结果显示,该蛋白能与抗结核分支杆菌阳性血清发生特异性反应。研究结果为结核病临床诊断抗原的筛选奠定了基础。

关 键 词:结核分支杆菌  Rv3117基因  克隆  原核表达

Cloning and Prokaryotic Expression of Mycobacterium tuberculosis Rv3117 Gene
LIU Yang,SONG Ji-wei,ZENG Fan-li,SHI Kun,LI Jian-ming,DU Rui.Cloning and Prokaryotic Expression of Mycobacterium tuberculosis Rv3117 Gene[J].Progress In Veterinary Medicine,2015,36(5).
Authors:LIU Yang  SONG Ji-wei  ZENG Fan-li  SHI Kun  LI Jian-ming  DU Rui
Abstract:
Keywords:
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