| 小麦种子过氧化物酶基因wp1的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
| |
| 引用本文： | 单丽伟,罗海霞,范三红.小麦种子过氧化物酶基因wp1的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2009,37(3):213-218. |
| |
| 作者姓名： | 单丽伟 罗海霞 范三红 |
| |
| 作者单位： | 单丽伟,SHAN Li-wei(西北农林科技大学理学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西,杨凌,712100);罗海霞,LUO Hai-xia(西北农林科技大学生命科学学院,陕西,杨凌,712100);范三红,郭蔼光,FAN San-hong,GUO Ai-guang(西北农林科技大学生命科学学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学陕西省农业分子重点实验室,陕西,杨凌,712100)
|
| |
| 摘 要： | 【目的】克隆小麦种子过氧化物酶基因wp1,并利用原核系统表达纯化。【方法】通过RT-PCR从小麦未成熟种子中扩增wp1基因cDNA,构建His-tag和MBP融合表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。使用直链淀粉亲和层析获得MBP-WP1融合蛋白,并以ABTS为底物检测酶活性。【结果】获得的wp1基因cDNA编码一种358个氨基酸残基的蛋白产物,其序列与大麦BP1相似性高达89%;空间结构预测结果表明,小麦WP1属于第三类过氧化物酶,具有该家族成员典型的血红素和钙离子结合位点;His-Tag融合的WP1主要以包涵体形式存在,而MBP融合的WP1主要以可溶形式存在,表达量分别达到总蛋白的18.2%和34.6%;纯化获得的MBP-WP1融合蛋白可检测到过氧化物酶活性。【结论】使用原核系统可高效表达出可溶性的、具有部分活性的WP1蛋白。
|
| 关 键 词： | 小麦 种子过氧化物酶 高GC含量 基因克隆 基因表达 |
| 收稿时间： | 8/7/2008 12:00:00 AM |
Cloning and expression of wheat peroxidase 1 (wpl) in E. coil |
| |
| SHAN Li-wei,LUO Hai-xia,FAN San-hong,GUO Ai-guang.Cloning and expression of wheat peroxidase 1 (wpl) in E. coil[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2009,37(3):213-218. |
| |
| Authors: | SHAN Li-wei LUO Hai-xia FAN San-hong GUO Ai-guang |
| |
| Institution: | b,c(a.College of Science,b.College of Life Sciences,c.Key Laboratory of Agricultural Molecular Biology in Shaanxi Province,Northwest A&F University,Yingling,Shaanxi 712100,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | wheat seed peroxidase high GC content gene cloning gene expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
