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甘蓝型油菜透明种皮12(TT12)基因家族反义抑制植物表达载体的构建
作者姓名:黄华磊  雷波  柴友荣
作者单位:西南大学农学与生物科技学院 农业部生物技术与作物品质改良重点实验室,重庆市作物品质改良重点实验室,重庆市油菜工程技术研究中心,西南大学农学与生物科技学院,农业部生物技术与作物品质改良重点实验室,重庆市作物品质改良重点实验室,重庆市油菜工程技术研究中心,西南大学农学与生物科技学院,农业部生物技术与作物品质改良重点实验室,重庆市作物品质改良重点实验室,重庆市油菜工程技术研究中心,重庆400716,重庆400716,重庆400716
基金项目:国家863项目“甘蓝型油菜类黄酮途径功能基因克隆及黄籽性状代谢工程研究”(2006011021024);重庆市自然科学基金重点项目“甘蓝型黄籽油菜品质形成的分子生物学机理研究”(8446),国家自然科学基金重点项目“甘蓝型油菜优质高效黄籽性状的遗传基础研究”(30330400).
摘    要:【研究目的】构建一个同时反义共抑制甘蓝型油菜(Brassica napus)透明种皮12基因家族(BnTT12)转录的植物表达载体。【方法】通过PCR扩增得到BnTT12家族一段503bp的特异保守片段TT12A,通过亚克隆整合到中间载体pCambia2301G,构建TT12反义植物表达载体pCambi-a2301G-TT12A。采用液氮冻融法将其转化到根癌农杆菌。【结果】经过PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证实载体构建成功,并转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成TT12反义表达载体的工程菌株。【结论】pCambia2301G-TT12A的成功构建为利用此反义载体通过遗传转化获得转基因新型黄籽油菜和进一步探明TT12基因在甘蓝型油菜种皮色素合成途径中的分子生物学机理奠定了基础。

关 键 词:TT12  类黄酮  反义  载体  甘蓝型油菜

Construction of A Plant Expressing Vector for Antisense Suppression of TRANSPARENT TESTA 12 (TT12) gene Family in Oilseed Rape (Brassica napus)
Authors:Huang Hualei  Lei Bo  Chai YouRong
Abstract:
Keywords:TRANSPARENT TESTA 12 (TT12)  Flavonoid  Antisense  Vector  Brassica napus
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