| 鸭RLRs和IFN基因SYBRGREENⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈翠腾,傅光华,黄瑜,傅秋玲,万春和,程龙飞,陈红梅,施少华. 鸭RLRs和IFN基因SYBRGREENⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 福建农业学报, 2015, 0(3) |
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| 作者姓名： | 陈翠腾 傅光华 黄瑜 傅秋玲 万春和 程龙飞 陈红梅 施少华 |
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| 作者单位： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州,350013 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31201936)；国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43)；福建省科技计划项目---省属公益类科研院所基本科研专项 |
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| 摘 要： | 首次建立以GAPDH为内参,同时检测鸭RIG-I、MDA5、IFN-α和IFN-γ等4种mRNA相对表达量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法(RT-FQ-PCR)。以目的基因的克隆质粒为标准品,建立标准曲线,并进行熔解曲线、重复性及稳定性分析。该方法 Ct值线性范围为12.0~32.0;目的基因(RIG-I、MDA5、IFN-α、IFN-γ)和内参基因(GAPDH)的扩增效率均在95%~105%,其相关系数均在0.99以上;扩增产物的熔解曲线都只出现1个特异性单峰,无引物二聚体或其他非特异性产物生成,RIG-I、MDA5、IFN-α、IFN-γ和GAPDH的Tm值依次为(81.9±0.33)、(81.9±0.32)、(93.6±0.23)、(81.8±0.28)、(87.8±0.24)℃,其敏感度均达到100copies·μL-1,重复性和稳定性好,为从mRNA水平上深入研究RIG-I样受体、干扰素与鸭机体免疫功能相关性奠定了基础。
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| 关 键 词： | RIG-I 样受体 干扰素 实时荧光定量 PCR |
Establishment of a Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Duck RIG-I Like Receptors and interferon Genes |
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| CHEN Cui-teng,FU Guang-hua,HUANG Yu,FU Qiu-ling,WAN Chun-he,CHENG Long-fei,CHEN Hong-mei,SHI Shao-hua. Establishment of a Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Duck RIG-I Like Receptors and interferon Genes[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2015, 0(3) |
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| Authors: | CHEN Cui-teng FU Guang-hua HUANG Yu FU Qiu-ling WAN Chun-he CHENG Long-fei CHEN Hong-mei SHI Shao-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RIG-I like receptors Interferon real-time fluorescence quantitative PCR |
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