| 应用多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒 |
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| 引用本文： | 王洪星,张雨良,王健华,章绍延,熊国如,刘志昕.应用多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒[J].热带农业科学,2012(7):52-56,62. |
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| 作者姓名： | 王洪星 张雨良 王健华 章绍延 熊国如 刘志昕 |
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| 作者单位： | 海南大学环境与植物保护学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务专项(No.ITBB110303);现代农业产业技术体系建设专项(No.nycytx-24) |
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| 摘 要： | 基于已报道的甘蔗黄叶病毒(Sugarcane Yellow Leaf Virus,ScYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghummosaic virus,SrMV)NSP基因序列设计特异性引物,建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR(real time-quantitative,RT-qPCR)检测方法。在此基础上,利用扩增产物Tm值的不同,建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法,两种病毒扩增产物的Tm值分别为80.8～82.8℃和84.6～86.6℃。检测数据显示:SrMV和ScYLV均有各自的特异性峰值出现,而健康植株无特异性峰值;在单独检测中的检出水平分别可达500和250 copy/μL;两种病毒Tm值的批内变异系数分别为0.03%和0.02%,批间变异系数分别为2.06%和3.12%。综上所述,所建立的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性。
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| 关 键 词： | 甘蔗黄叶病毒 高梁花叶病毒 SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR 病毒检测 |
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