| 单头灰飞虱体内两种水稻病毒的双重一步法RT-PCR检测 |
| |
| 引用本文： | 李俊敏,周燕茹,孙宗涛,王旭,谢礼,陈剑平.单头灰飞虱体内两种水稻病毒的双重一步法RT-PCR检测[J].浙江农业学报,2014(2). |
| |
| 作者姓名： | 李俊敏 周燕茹 孙宗涛 王旭 谢礼 陈剑平 |
| |
| 作者单位： | 浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地农业部植保生物技术重点实验室浙江省植物病毒学重点实验室浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所;浙江师范大学化学与生命科学学院; |
| |
| 基金项目： | 浙江省自然科学基金(LQ12C14002);浙江省农业科学院重点实验室开放课题 |
| |
| 摘 要： | 灰飞虱传播的水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)和水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)是危害我国水稻生产最主要的2种病毒,建立灰飞虱体内RSV和RBSDV快速、可靠的检测方法是水稻生产中的重要问题。本研究根据RSV RNA3和RBSDV S10序列分别设计了2个病毒的特异性引物,通过退火温度和PCR循环数等条件的优化,建立了灰飞虱体内RSV和RBSDV快速鉴定的双重一步法RT-PCR体系。对一步法和两步法RT-PCR检测结果进行比较,表明2种方法均能准确有效鉴定灰飞虱体内的2种病毒,且两步法的检测效果略好于一步法。而灵敏度实验表明一步法RT-PCR可以从0.005 ng·μL-1的灰飞虱RNA初始模板中准确检测到病毒,完全满足单头灰飞虱体内病毒检测的需要。应用本研究建立的双重一步法RT-PCR体系对200头获毒灰飞虱样品中的RSV和RBSDV进行了检测,结果进一步证实了此方法的稳定性和可靠性。
|
| 关 键 词： | 灰飞虱 水稻条纹病毒 水稻黑条矮缩病毒 RT-PCR |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
