| 根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立 |
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| 引用本文： | 赵冬梅,何佳昱,杨志辉,朱杰华,徐进.根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立[J].河南农业科学,2014(9). |
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| 作者姓名： | 赵冬梅 何佳昱 杨志辉 朱杰华 徐进 |
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| 作者单位： | 河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,071000 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 |
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| 摘 要： | 为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
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| 关 键 词： | 致病疫霉 根癌农杆菌介导的转化 T DNA 转化效率 |
Establishment of Agrobacteriumtumefaciens-Mediated Transformation System for Phytophthora infestans |
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| ZHAO Dong-mei,HE Jia-yu,YANG Zhi-hui,ZHU Jie-hua,XU Jin.Establishment of Agrobacteriumtumefaciens-Mediated Transformation System for Phytophthora infestans[J].Journal of Henan Agricultural Sciences,2014(9). |
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| Authors: | ZHAO Dong-mei HE Jia-yu YANG Zhi-hui ZHU Jie-hua XU Jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phytophthora infestans Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT) T-DNA transformation efficiency |
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